Garantie de satisfaction à 100% Disponible immédiatement après paiement En ligne et en PDF Tu n'es attaché à rien
logo-home
Recherché précédemment par vous
Recherché précédemment par vous
logo
Samenvatting HT4 over eiwitzuivering - Farmaceutische biotechnologie (K0B04A) €5,48
Ajouter au panier
Accédez rapidement à
Aperçu
  2.  
  3. Katholieke Universiteit Leuven (KU Leuven)
  4.  
  5. Farmaceutische Wetenschappen
  6.  
  7. Farmaceutische biotechnologie (K0B04A)

Resume

Samenvatting HT4 over eiwitzuivering - Farmaceutische biotechnologie (K0B04A)
 0 fois vendu

Dit is hoofdstuk 4 van biotechnologie over eiwitzuivering, samenvatting met extra uitleg en notities

Aperçu 2 sur 8  pages

Infos sur le Document

  • 22 mai 2025
  • 8
  • 2023/2024
  • Resume

Sujets

École, étude et sujet

Tous les documents sur ce sujet (9)

Vendeur

avatar-seller
farmaciestudent1

Aperçu du contenu

HOOFDSTUK 4: EIWITOPZUIVERING

Introductie:

Na productie: eiwitten opgezuiverd worden
- Recombinante eiwit (interesse): 1-5 % v proteïne massa
- Alle onzuiverheden verwijderen
o Belangrijk voor opzuiveren:
 Fysicochemische eig v recombinante product en onzuiverheden
 Bronnen v onzuiverheden bv: contaminatie tijdens productie, …
- Opzuivering kostelijker dan productie zelf

Staalvoorbereiding:

Centrifugatie:
= Scheiden v mengsels door centrifugale kracht
- Centrifuge: toestel die rotor in roterende beweging om vaste as laat roteren
o Principe: sedimentatie
 Oiv Zw scheiden stoffen zich obv dichtheid/zwaarte/vorm
 Centrifuge: g-kracht >> zwaartekracht
 Aan buitenkant zwaardere dingen (meer kracht op)
- Soorten scheidingen d.m.v. centrifugatie
o Pelleting:
 Meest voorkomende
 Pellet: op bodem centrifugebuis deeltjes geconcentreerd
 Supernatans: overgebeleven oplossing
 Vaak om bacteriën te oogsten of verwijderen
o Dichtheidsgradiënt:
 Scheiding obv dichtheid
 Betere resolutie dan klassieke
 Principe:
 Staal op matrix met gradiënt v dichtheid plaatsen (toe- of afnemen)
 Centrifugatie
 Moleculen in evenwicht met omgeving/matrix met zelfde dichtheid
 Gescheiden deeltjes geoogst
 Toepassingen:
 Minder voor eiwitzuiveringen
 Meer voor scheiding cellen, celorganellen, virussen, … (scheiding
bloed)
Dialyse:
= door selectieve en passieve diffusie via semi-permeabel membraan verwijderen v kleine
ongewenste verbindingen uit macromoleculen in oplossing
- Tot evenwicht in concentratie oplossing binnen/buiten membraan
- Door membraan:
o Wel: Kleine moleculen en bufferzouten
o Niet: moleculen groter dan poriegrootte vh membraan (bv eiwitten)
o Membranen: vers grootte bv: 3 kDa, 10 kDa, 50 kDa, …
o V staal << V buffer

, - Principe:
o Eiwitten in recipiënt afgelijnd door membraan
o Geheel in tank brengen met veel buffer
o Uitwisseling componenten v ene kant nr andere
o Buffer verversen + herhalen tot buffer hebben die ons interesseert
- Toepassingen:
o Verwijderen kleine onzuiverheden
o Veranderen v buffer:
 Na/voor zuiveringsstap
 Formulatiebuffer
Cellen openbreken:
- Bij zoogdiercellen & gisten: product meestal gesecreteerd nr medium  met supernatans
verder gewerkt
- Bij bacteriën: productie meestal intracellulair  verder werken met pellet, supernatans weg
o Eerst cellen openbreken
o Celwand bacteriën bemoeilijkt openbreken
o Fysieke disruptie methoden VS oplossing gebaseerde methoden
- Methoden:
o Fysieke methoden:
 French press:
 Onder grote druk (tot 1000 bar) door smalle opening geforceerd
 Hoge schuifkrachten op cellen
 Uit smalle opening: in fractie v seconde in atmosfersiche druk
 Cellen breken open (soms herhalen)
 Voordeel:
 Capaciteit: 1000den liters per uur
 Nadelen:
 Grote krachten: warmte-ontwikkeling  eiwitdenaturatie
 Systeem adequaat koelen
 Schudden in aanwezigheid v inerte parels (bv. glas):
 Mengen met parels
 Intens schudden/draaien
 Bacteriën breken door botsen of geplet te worden
 Optimale verhouding parels/bacteriën & schud-/draaisnelheid
noodzakelijk + afh v type bacterie
 Voordeel:
 Capaciteit: 1000den liters per uur
 Nadelen:
 Grote krachten: warmte-ontwikkeling  eiwitdenaturatie
 Systeem adequaat koelen
 Sonicatie:
 Pulsen hoog frequente geluidsgolven
 Probe onderdompelen  doorheen vloeibaar milieu sturen
 Ontstaan microscopische luchtbelletjes
 Imploderen
 Ontstaan schokgolfjes  openbreken cellen
 Nadelen:
 Warmte-ontwikkeling  eiwitdenaturatie: opl systeem
adequaat koelen en korte implusen ipv langdurige
 Enkel kleinere volumes (< 100 ml) + laboratoiumschaal
o Toevoegen detergenten:

Les avantages d'acheter des résumés chez Stuvia:

Qualité garantie par les avis des clients

Qualité garantie par les avis des clients

Les clients de Stuvia ont évalués plus de 700 000 résumés. C'est comme ça que vous savez que vous achetez les meilleurs documents.

L’achat facile et rapide

L’achat facile et rapide

Vous pouvez payer rapidement avec iDeal, carte de crédit ou Stuvia-crédit pour les résumés. Il n'y a pas d'adhésion nécessaire.

Focus sur l’essentiel

Focus sur l’essentiel

Vos camarades écrivent eux-mêmes les notes d’étude, c’est pourquoi les documents sont toujours fiables et à jour. Cela garantit que vous arrivez rapidement au coeur du matériel.

Foire aux questions

Qu'est-ce que j'obtiens en achetant ce document ?

Vous obtenez un PDF, disponible immédiatement après votre achat. Le document acheté est accessible à tout moment, n'importe où et indéfiniment via votre profil.

Garantie de remboursement : comment ça marche ?

Notre garantie de satisfaction garantit que vous trouverez toujours un document d'étude qui vous convient. Vous remplissez un formulaire et notre équipe du service client s'occupe du reste.

Auprès de qui est-ce que j'achète ce résumé ?

Stuvia est une place de marché. Alors, vous n'achetez donc pas ce document chez nous, mais auprès du vendeur farmaciestudent1. Stuvia facilite les paiements au vendeur.

Est-ce que j'aurai un abonnement?

Non, vous n'achetez ce résumé que pour €5,48. Vous n'êtes lié à rien après votre achat.

Peut-on faire confiance à Stuvia ?

4.6 étoiles sur Google & Trustpilot (+1000 avis)

73647 résumés ont été vendus ces 30 derniers jours

Fondée en 2010, la référence pour acheter des résumés depuis déjà 15 ans

Commencez à vendre!
€5,48
  • (0)
Ajouter au panier
Ajouté
OSZAR »